Alison Peebles se formó como pintora en la Edinburgh College of Art y en 1983 cofundó la compañía teatral escocesa Communicado junto con Gerry Mulgrew y Rob Pickavance. En teatro interpretó a Lady Macbeth en una producción de 1993 en el Tron Theatre dirigida por Michael Boyd. Su trayectoria abarca teatro, cine, televisión y radio. Dirigió el largometraje AfterLife, galardonado con el Audience Award en el Festival Internacional de Cine de Edimburgo en 2003. En 2006 apareció en el documental de BBC Scotland Multiple, donde reveló su diagnóstico de esclerosis múltiple.